Il treno 581 parte alle ore 05:45, generalmente dal binario 13
Il treno 581 arriva alle ore 08:25, generalmente al binario 4
La durata prevista del viaggio è di 2 ore e 40 minuti
Il treno 581 presenta una carrozza attrezzata per il trasporto di passeggeri su sedia a rotelle
Il treno 581 effettua servizio di trasporto bici al seguito.
| Stazione | Arrivo | Partenza | Bin. |
| FIRENZE SANTA MARIA NOVELLA Orari treni stazione Firenze Santa Maria Novella | 05:45 | 13 | |
| FIRENZE CAMPO MARTE Treni da Firenze Santa Maria Novella a Firenze Campo Marte | 05:52 | 05:52 | 2 |
| AREZZO Treni da Firenze Santa Maria Novella a Arezzo | 06:25 | 06:25 | 3 |
| TERONTOLA CORTONA Treni da Firenze Santa Maria Novella a Terontola Cortona | 06:45 | 06:45 | 2 |
| CHIUSI-CHIANCIANO TERME Treni da Firenze Santa Maria Novella a Chiusi-chianciano Terme | 07:04 | 07:04 | 4 |
| ORVIETO Treni da Firenze Santa Maria Novella a Orvieto | 07:25 | 07:25 | 2 |
| ROMA TERMINI Orari treni stazione Roma Termini | 08:25 | 4 |